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如何才能用好安捷倫色譜柱這件事確實值得好好學習

瀏覽次數↟·:155釋出日期↟·:2022-07-21
  安捷倫色譜柱的正確使用和維護非常重要◕☁↟·╃,稍有不慎就會降低色譜柱效率◕☁↟·╃,縮短使用壽命◕☁↟·╃,甚至損壞色譜柱₪☁☁。在色譜操作過程中◕☁↟·╃,為了維護色譜柱◕☁↟·╃,需要注意以下幾個問題₪☁☁。
  
  1││✘、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動₪☁☁。溫度的突然變化或色譜柱從高處墜落都會影響柱內的填充情況;柱壓的突然升高或降低也會對柱內的填料產生衝擊◕☁↟·╃,因此應緩慢調節流速◕☁↟·╃,進樣時閥門轉動不宜過慢₪☁☁。
  
  2││✘、溶劑的組成應逐漸改變◕☁↟·╃,尤其是反相色譜₪☁☁。不應直接由有機溶劑改為全水◕☁↟·╃,反之亦然₪☁☁。
  
  3││✘、一般來說◕☁↟·╃,色譜柱不能反衝₪☁☁。只有在生產廠家表明可以反衝的情況下◕☁↟·╃,才能透過反衝去除殘留在柱頭的雜質₪☁☁。否則◕☁↟·╃,反衝會迅速降低柱效₪☁☁。
  
  4││✘、選擇使用合適的流動相(尤其是pH)◕☁↟·╃,避免破壞固定相₪☁☁。有時可以在進樣器前面連線一個預柱₪☁☁。分析柱為鍵合矽膠時◕☁↟·╃,前置柱為矽膠◕☁↟·╃,可以使流動相在進入分析柱前被矽膠“飽和”◕☁↟·╃,避免矽膠基質在分析柱中溶解₪☁☁。
 
  

安捷倫色譜柱
 

 

  5││✘、避免將基質複雜的樣品◕☁↟·╃,尤其是生物樣品直接注入色譜柱₪☁☁。需要對樣品進行預處理或在進樣器和色譜柱之間連線保護柱₪☁☁。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱₪☁☁。保護柱可以而且應該經常更換₪☁☁。
  
  6││✘、經常用強溶劑清洗色譜柱◕☁↟·╃,以除去柱內殘留的雜質₪☁☁。清洗時◕☁↟·╃,對流路徑系統中流動相的更換應逐漸用可混溶的溶劑轉移◕☁↟·╃,每個流動相的體積應為柱體積的20倍左右◕☁↟·╃,即常規分析需要50~75ml₪☁☁。
  
  7││✘、色譜柱存放時◕☁↟·╃,用乙腈或甲醇填充色譜柱◕☁↟·╃,並擰緊色譜柱接頭◕☁↟·╃,防止溶劑揮發乾燥₪☁☁。不要將緩衝溶液留在柱子中過夜或更長時間₪☁☁。
  
  8││✘、色譜柱在使用過程中◕☁↟·╃,如果壓力升高◕☁↟·╃,一種可能是燒結過濾器堵塞₪☁☁。此時應更換或拆下過濾器進行清洗;另一種可能是大分子進入柱子◕☁↟·╃,汙染柱頭;如果柱效降低或色譜峰變形◕☁↟·╃,柱頭可能會塌陷◕☁↟·╃,死體積可能會增加₪☁☁。
  
  一般安捷倫色譜柱在正確使用的情況下◕☁↟·╃,使用壽命可達2年以上₪☁☁。矽膠基填料只能在ph2~9範圍內使用₪☁☁。柱子使用一段時間後◕☁↟·╃,一些吸附力強的物質可能會殘留在柱子頂部◕☁↟·╃,尤其是一些有色物質更容易被看到吸附在柱子頂部的填料上₪☁☁。新色譜柱使用一段時間後◕☁↟·╃,柱頂填料可能會塌陷◕☁↟·╃,降低柱效₪☁☁。這時也可以加入填料來恢復柱效₪☁☁。
  
  安捷倫色譜柱每次工作後◕☁↟·╃,最好用洗脫能力強的洗脫液清洗₪☁☁。例如◕☁↟·╃,ODS柱應用甲醇清洗至基線平衡₪☁☁。當使用鹽緩衝溶液作為流動相時◕☁↟·╃,應在使用後用無鹽流動相清洗₪☁☁。含有鹵素(氟││✘、氯││✘、溴)的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道◕☁↟·╃,不應長時間接觸₪☁☁。如果安裝在HPLC儀器上的色譜柱不經常使用◕☁↟·╃,應每4-5天開啟並清洗15分鐘₪☁☁。
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